为了满足更多老师和同学们的实验需要,近日我们开展了2022新年第一期Western blot 技术专题讲座,涉及实验原理,实验流程,方法应用,仪器操作等方方面面,开课第一场就得到大家的认同,好评如潮!
现场回放
1981 年美国斯坦福大学的乔治·斯塔克(George Stark)发明了蛋白质印迹(Western blot),至今已有40年的时间。Western blot作为一个经典的蛋白定量技术,被越来越多的人所使用,已成为每个分子生物学实验室所必须要做的一个实验。
Western blot常用的几种成像方法及优劣势如下:
1,高丰度表达的蛋白都被做完了,剩下的尽是低丰度表达的蛋白,需要更加灵敏的成像技术。
2,容易获取的样品都被做完了,剩下的尽是不容易获取的样品,一份样品要做多个实验,也是需要更加灵敏的成像技术,且要求实验尽量要一次能做成,没有样品用来做大量的条件优化。
3,蛋白表达差异不大的都被做掉了,剩下的尽是些蛋白表达差异非常大,需要能准确定量的成像技术。
虽然冷CCD化学发光成像方法有多种优势,被绝大多数人使用,但是由于其本身的技术限制,在面临超低丰度蛋白、稀有样品和表达差异巨大的样品时就显得无能为力了,这些随着科研逐步深入所带来的难题急需新的技术出现来解决。
这些技术限制包括:
1,冷CCD成像仪器所用的芯片本身太小,大多只有1英寸或者更小,信号获取的能力远远不够,导致微弱信号不能被采集到。
2,冷CCD成像仪器成像芯片本身的单个像素尺寸太小,边长一般在3-6um之间,像素太小导致芯片本身储存信号的能力太小,导致信号极易过度曝光,无法准确定量。
3,冷CCD成像Western blot 膜离CCD距离太远,导致绝大部分的光信号传输过程中直接损失掉了,并未到达CCD感光芯片,进一步降低信号采集的能力。
4,冷CCD成像需要前面加一个镜头才能实现成像,镜头内部都有一系列的透镜组,这些透镜组也会将本就非常微弱的化学发光信号阻挡掉一大半。
5,冷CCD成像所需成像时间太长,CCD本身的噪音随着时间的延长会随之积累,弱信号会被这些噪音所掩盖掉以至于不能成像。
技术的瓶颈限制了冷CCD成像技术的发展,也间接影响科研的发展。工欲善其事必先利其器,必须要有更先进的技术才能突破现有方法的瓶颈,进而更好的为科研服务。于是E-BLOT应运而生!
E-BLOT聚焦生命科学领域,从蛋白领域切入,为科学家提供创新的研究工具。联合木马打造e-Blot Touch Imager,将接触式成像方式应用到WB化学发光成像领域,极大的提高了成像的灵敏度、动态范围和成像速度。将WB成像带入一个全新的时代。
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▼革命性创新 · e-Blot Touch Image▼
TOUCH IMAGER凭借独创的核心技术、人性的操作体验和出色的外观设计,获得了2018年德国红点设计大奖。
TOUCH IMAGER系列产品用于Western blot,Southern blot成像等化学发光成像,微量滴定板成像等应用。具有极灵敏,极速成像,超宽定量范围以及小尺寸等优势,显著优于其他同类产品。
01
信号无损-灵敏度比冷CCD成像提高三个数量级
02
革命性创新
① NASA级别超大尺寸感光芯片,芯片尺寸是冷CCD成像芯片的137倍;
② 成像夹角180°,所有光信号全部收集,成像效率更高,图像质量更好。
03
定量范围比冷CCD成像提高100倍
e-Blot 满阱电子容量达到了125万e-,是冷CCD成像系统的 70-100倍,巨量的电子容量保证低信号被检出的同时强信号不过曝。
04
大于95%的样品1秒成像
e-Blot像素尺寸:
100um*100um=10000
其他品牌像素尺寸:
4.5um*4.5um=20.25
单个像素面积相差493倍,
巨大的像素尺寸带来极速成像
05
e-BLOT公司全球首创的接触式化学发光成像新技术,相对于冷CCD成像:
小体积
下一代成像系统,拯救您的western!
20cm*27cm*5cm 尺寸大小犹如IPAD
为生命科学研究提供创新工具
06
针对科研人员在western成像中遇到的这些问题,我们此前展开了这样一场活动。
【工欲善其事,必先利其器】,希望透过我们的设备去帮助科研人员解决这一方面的难题。以下则是在此前活动当中收集到的一些资料:
注:上图中左侧是国际知名品牌冷CCD成像设备的60秒成像结果,右侧为TOUCH IMAGER的1秒成像结果。
注:上图左侧是国内品牌冷CCD成像设备拍照60秒的成像结果,右侧是TOUCH IMAGER1秒成像的结果。
注:这一组左侧是传统的光学胶片1分钟的成像结果,而右侧依然是TOUCH IMAGER 1秒的成像结果
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